條件性敲除小(大)鼠

技術原理簡介

條件性基因敲除主要是通過Cre/LoxP重組系統(tǒng)來實現(xiàn)的。該系統(tǒng)是位點特異性重組酶系統(tǒng)，已發(fā)展成為在體內(nèi)、外進行遺傳操作的有力工具。其可以使靶基因的表達或缺失發(fā)生在試驗動物發(fā)育的某一階段或某一特定的組織器官。此外，若與控制Cre表達的其他誘導系統(tǒng)相結合，還可以對某一基因同時實現(xiàn)時空兩方面的調(diào)控。

唯尚立德公司自主研發(fā)的第三代基因敲除敲入系統(tǒng)，該系統(tǒng)采用受精卵注射的方式將一對LoxP序列高效地插入到基因組上，較傳統(tǒng)的ES系統(tǒng)的方法提高了近2000倍。本公司最快3個月可以得到Founder！鄭重承諾，失敗全額退款！

TALEN/CRISPR構建條件性敲除小(大)鼠技術流程圖

服務流程及周期

服務流程及周期圖

步驟	內(nèi)容	周期
Cas9/gRNA的合成和同源模板(Donor)構建	合成Cas9/gRNA，檢測Cas9/gRNA活性，構建同源模板質(zhì)粒	2個月
得到Founder	Cas9/gRNA體外轉錄成mRNA和Donor質(zhì)粒共同顯微注射受精卵，胚胎移植到代孕母鼠子宮，3周后出生，2周齡基因型鑒定。	2-3個月
得到F1代雜合子	2個月后性成熟，F(xiàn)ounder和野生型小鼠交配，3周后出生，2周齡基因型鑒定，獲得穩(wěn)定傳代的基因突變雜合子F1代。	3-4個月